鹦鹉双病毒要去哪可以检测?
1、首先,要确认下你所处的地区是否拥有该病的实验室检测能力(这一点很重要); 其次,如果要做病毒分离鉴定,要确认你所处地区具备该病原的接种动物(幼鼠)和动物模型。 最后,如果要做病毒基因测序,要确认有该病毒的核酸提取方法,以及对应的序列分析平台。 如果上述条件都满足,那么就可以做进一步的研究工作了。 2、病毒分离与鉴定 将病料用30%的Hank's液(成分见说明书)稀释后,接种于9~11日龄SPF鸡胚,每胚0.1ml,同时设空白对照。 接种后48小时观察,凡有血凝特性的病毒,均能引起鸡胚死亡或者胎体收缩变形,剖检可见心、肝、脾、肺脏出血,并出现典型的病理变化。 在感染组鸡胚的尿囊液及病料中,均可检测到特异的病毒抗原,而空斑形成试验阳性,进一步证明为病毒的感染所致。 从病毒感染的鸡胚中,可分离到2种形状不同的病毒粒子,电镜下观察呈圆状或椭圆形,其直径大小约为50nm。与阳性对照的流感病毒相比,两者的形态极为相似,不易区分。
3、病毒基因组测序 取适量病毒提取液进行DNA克隆,构建基因文库。 根据已公布的鹦鹉热衣原体基因序列,设计合成一组引物。以病毒基因组DNA为原料,采用poly(dT)法,经酚/氯仿抽提后,纯化DNA片段。利用实时荧光定量PCR扩增病毒基因组片段。 以本试验获得的基因片段为模板,设计特异性引物,进行DNA测序。